生物
研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达.抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段.(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中(填“低表达”或“高表达”).H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示.制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建区基因,转入原核细胞表达并提纯.(2)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与细胞进行融合,使用的化学诱导剂是,细胞融合的原理是.(3)将

2019-04-09

研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达.抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段.
(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中______(填“低表达”或“高表达”).H蛋白是一个跨膜蛋白,结构如图所示.制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建______区基因,转入原核细胞表达并提纯.
(2)将H蛋白注射到小鼠体内,取该小鼠的脾脏细胞与______细胞进行融合,使用的化学诱导剂是______,细胞融合的原理是______.
(3)将融合细胞在______培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长.将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,应用______技术进行抗体阳性检测.经多次筛选,就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞.
(4)将筛选得到的杂交瘤细胞,经过______或小鼠腹腔内培养,获取大量的单克隆抗体.
(5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞.这充分体现了单克隆抗体______的特点.
优质解答
(1)根据题意可知,H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达,因此原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中低表达;由于抗体主要存在于细胞外液中,因此根据H蛋白的结构图可知,若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因,由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区.
(2)在制备单克隆抗体过程中,需要将脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,诱导其融合的试剂为聚乙二醇,其融合的原理是借助于细胞膜的流动性.
(3)将融合细胞接种在选择培养基中,从中选出杂交瘤细胞,利用抗原-抗体杂交技术最后选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞.
(4)将杂交瘤细胞经过体外培养或小鼠腹腔内培养,获得大量的单克隆抗体.
(5)单克隆抗体的优点是特异性强,灵敏度高.
故答案为:
(1)低表达   胞外
(2)骨髓瘤     PEG(或“聚乙二醇”)   细胞膜的流动性
(3)选择       抗原-抗体杂交
(4)体外(培养)
(5)特异性强(或“识别抗原部位专一”)
(1)根据题意可知,H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达,因此原癌基因的表达产物H蛋白在正常组织中低表达;由于抗体主要存在于细胞外液中,因此根据H蛋白的结构图可知,若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因,由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区.
(2)在制备单克隆抗体过程中,需要将脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合,诱导其融合的试剂为聚乙二醇,其融合的原理是借助于细胞膜的流动性.
(3)将融合细胞接种在选择培养基中,从中选出杂交瘤细胞,利用抗原-抗体杂交技术最后选出产生单克隆抗体的杂交瘤细胞.
(4)将杂交瘤细胞经过体外培养或小鼠腹腔内培养,获得大量的单克隆抗体.
(5)单克隆抗体的优点是特异性强,灵敏度高.
故答案为:
(1)低表达   胞外
(2)骨髓瘤     PEG(或“聚乙二醇”)   细胞膜的流动性
(3)选择       抗原-抗体杂交
(4)体外(培养)
(5)特异性强(或“识别抗原部位专一”)
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