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(2012•江西模拟)【生物--选修3现代生物科技专题】图一是利用基因工程生产人胰岛素的主要流程图,图二是生产过程中所制备的带有目的基因供体DNA分子及运载体(质粒)的示意图.箭头所指为相应限制性核酸内切酶的识别位点,Tetr表示四环素抗性基因,Tetr上游有基因C,基因C的表达产物会阻断Tetr基因的表达.请回答下列问题:(1)通过转基因技术生产胰岛素工程菌的步骤是:、、、,图一中的供体细胞是(2)第②步中需要的酶是,第④步常用的方法是.(3)若图一所示过程中以Tetr为标记基因,则第③中应选用对供体D

2019-04-29

(2012•江西模拟)【生物--选修3现代生物科技专题】
图一是利用基因工程生产人胰岛素的主要流程图,图二是生产过程中所制备的带有目的基因供体DNA分子及运载体(质粒)的示意图.箭头所指为相应限制性核酸内切酶的识别位点,Tetr表示四环素抗性基因,Tetr上游有基因C,基因C的表达产物会阻断Tetr基因的表达.请回答下列问题:

(1)通过转基因技术生产胰岛素工程菌的步骤是:______、______、______、______,图一中的供体细胞是______
(2)第②步中需要的酶是______,第④步常用的方法是______.
(3)若图一所示过程中以Tetr为标记基因,则第③中应选用______对供体DNA和质粒进行切割;为检测转化结果,将经第④步处理后的大肠杆菌培养液接种含有______培养基上,长出的菌落就是成功插入目的基因的菌落.
(4)基因工程中常选用大肠杆菌作为受体细胞,请说出大肠杆菌作为受体细胞的优点:______(至少回答出两点)
优质解答
(1)基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定.据图一分析可知,目的基因是人胰岛素基因.能表达出胰岛素的细胞是胰岛B细胞.
(2)由图一分析可知,目的基因是胰岛素基因,但是从图中可知,在胰岛B细胞中获取一种核酸为原料来合成胰岛素基因,是反转录法,此过程需要逆转录酶和DNA聚合酶.基因工程中受体细胞是微生物,可用一定浓度钙离子处理微生物,使其处于感受态.
(3)Tetr表示四环素抗性基因,Tetr上游有基因C,基因C的表达产物会阻断Tetr基因的表达,所以将目的基因插入基因C上破坏其结构,这样就没有阻碍Tetr基因的表达.所以可用BglⅠ、HindⅢ切割.为检测转化结果,将经第④步处理后的大肠杆菌培养液接种含有四环素培养基上,因为Tetr表示四环素抗性基因,可以表达出四环素抗性蛋白抵抗四环素,长出的菌落就是成功插入目的基因的菌落.
(4)基因工程中常选用大肠杆菌作为受体细胞,因为体积小,繁殖能力强,遗传物质相对比较少,容易培养,代谢旺盛、产量高等故答案为:
(1)获取目的基因   构建基因表达载体    将目的基因导入受体细胞   目的基因的检测与鉴定     人的胰岛B细胞
(2)逆转录酶和DNA聚合酶     感受态法(高浓度的钙离子溶液处理)
(3)BglⅠ、HindⅢ四环素
(4)繁殖能力强,容易培养,代谢旺盛、产量高等
(1)基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取②基因表达载体的构建③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测与鉴定.据图一分析可知,目的基因是人胰岛素基因.能表达出胰岛素的细胞是胰岛B细胞.
(2)由图一分析可知,目的基因是胰岛素基因,但是从图中可知,在胰岛B细胞中获取一种核酸为原料来合成胰岛素基因,是反转录法,此过程需要逆转录酶和DNA聚合酶.基因工程中受体细胞是微生物,可用一定浓度钙离子处理微生物,使其处于感受态.
(3)Tetr表示四环素抗性基因,Tetr上游有基因C,基因C的表达产物会阻断Tetr基因的表达,所以将目的基因插入基因C上破坏其结构,这样就没有阻碍Tetr基因的表达.所以可用BglⅠ、HindⅢ切割.为检测转化结果,将经第④步处理后的大肠杆菌培养液接种含有四环素培养基上,因为Tetr表示四环素抗性基因,可以表达出四环素抗性蛋白抵抗四环素,长出的菌落就是成功插入目的基因的菌落.
(4)基因工程中常选用大肠杆菌作为受体细胞,因为体积小,繁殖能力强,遗传物质相对比较少,容易培养,代谢旺盛、产量高等故答案为:
(1)获取目的基因   构建基因表达载体    将目的基因导入受体细胞   目的基因的检测与鉴定     人的胰岛B细胞
(2)逆转录酶和DNA聚合酶     感受态法(高浓度的钙离子溶液处理)
(3)BglⅠ、HindⅢ四环素
(4)繁殖能力强,容易培养,代谢旺盛、产量高等
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