GB/T 4789.8-2003
基本信息
标准号： GB/T 4789.8-2003
中文名称：食品卫生微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验
标准类别：国家标准(GB)
英文名称：Microbiological examination of food hygiene-Examination of Yersinia enterocolitica
标准状态：已作废
发布日期：2003-08-11
实施日期：2004-01-01
作废日期：2009-03-01
下载格式：pdf zip
标准分类号
标准ICS号： 数学、自然科学>>微生物学>>07.100.30
中标分类号：医药、卫生、劳动保护>>卫生>>C53食品卫生
关联标准
出版信息
出版社：中国标准出版社
页数：5页
标准价格：8.0
出版日期：2004-01-01
相关单位信息
首发日期：1984-12-25
复审日期：2004-10-14
起草人：王淑颖、周桂莲、付萍、杨宝兰
起草单位：中国预防医学中心卫生研究所
归口单位：中华人民共和国卫生部
提出单位：中华人民共和国卫生部
发布部门：中华人民共和国卫生部、中国国家标准化管理委员会
主管部门：卫生部
标准简介
本标准规定了小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验方法。本标准适用于各类食品及食物中毒样品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验。
标准图片预览
标准内容
ICS 07.100.30
中华人民共和国国家标准
GB/T4789.8--2003
代替GB/T4789.8—1994
食品卫生微生物学检验
小肠结肠炎耶尔森氏菌检验
Microbiological examination of food hygiene-Examination of Yersinia enterocolitica2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
2004-01-01实施
GB/T4789.8—2003
本标准对GB/T4789.81994《食品卫生微生物学检验本标准与GB/T4789.8—1994相比主要修改如下：小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》进行修订。按照GB/T1.1-2000对标准文本格式和文字进行修改。一修改并规范原标准中的“设备和材料”。本标准自实施之日起，GB/T4789.8—1994同时废止。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准主要起草人：王淑颖、周桂莲、付荐、杨宝兰。本标准于1984年首次发布，1994年第一次修订，本次为第二次修订。54
1范围
食品卫生微生物学检验
小肠结肠炎耶尔森氏菌检验Www.vV99.net
本标准规定了小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验方法。本标准适用于各类食品及食物中毒样品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验。2规范性引用文件
GB/T4789.8--2003
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T4789.1食品卫生微生物学检验总则GB/T4789.28—2003食品卫生微生物学检验染色法，培养基和试剂3设备和材料
3.1冰箱：0℃~4℃。
3.2恒温培养箱：36℃±1℃、4℃±1℃.26℃±1℃。3.3显微镜：10×~100×。
3.4均质器或灭菌乳钵。
3.5架盘药物天平：0g~500g，精确至0.5g。3.6灭菌试管：16mmX160mm、15mm×100mm。3.7灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5mL、10mL（具0.1mL刻度）。3.8灭菌锥形瓶：500mL、200mL。3.9灭菌培养血：直径90mm。
00.5mL注射器。
灭菌刀、剪子、镊子等。
3.12 小白鼠：12g~15g。
4培养基和试剂
4.1改良磷酸盐缓冲液PSB：按GB/T4789.28—2003中4.46规定。4.2CIN-I培养基：按GB/T4789.28--2003中4.47规定。4.3改良Y培养基：按GB/T4789.28—2003中4.48规定。4.4改良克氏双糖：按GB/T478928—2003中4.49规定。4.5山梨醇、鼠李糖、蔗糖、甘露醇等发酵管：按GB/T4789.28-2003中3.2规定。4.6鸟氨酸脱羧酶肉汤：按GB/T4789.28-2003中3.12规定。4.7半固体琼脂：按GB/T4789.28—2003中4.30规定。4.8V-P试剂：按GB/T4789.28—2003中3.4规定。4.9无菌矿物油。
4.10碱处理液：0.5%氯化物-0.5%氢氧化钾混合液。55
GB/T4789.8--2003
4.11尿素培养基：按GB/T4789.28-2003中4.38规定。5检验程序
小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序见图1。检样25g(mL)+225mL改良磷酸盐缓冲液4℃
肉及其制品，其他食品
碱处理，15s,4.5mL+0.5mL样液
I7d、14d、21d
接种CIN-I.改良Y培养基
26℃，48h
挑取可疑菌落，接种改良克氏双26c
尿素酶试验
半固体
26℃,24h;37℃,24h
生化分型
6操作步骤
6.1样品的采集和处理：见GB/T4789.1，样品采集后应尽快送检。乳及其制品
血清分型
6.2增菌培养：将食物样品与改良的磷酸盐缓冲液增菌液以1：10的比例混合，置4℃冰箱进行冷增菌。
6.3碱处理：将肉及其制品的冷增菌液0.5mL与碱处理液4.5mL混合15s。6.4分离培养：将冷增菌液和碱处理的冷增菌液分别接种CIN-I和改良Y培养基，于26℃48h培养后，在CIN-I上挑取红色牛眼状菌落，在改良Y上挑取无色透明、不粘稠的菌落，进行进一步的鉴定。6.5改良克氏双糖试验：将上述可疑菌落接种改良克氏双糖管，于26℃24h培养，将斜面和底部皆变黄者做进一步的生化鉴定。
GB/T4789.8-2003
6.6尿素酶试验和动力观察将改良克氏双糖上的可疑培养物接种到尿素培养基上，注意接种量要大，挑取接种环，振摇几秒钟，放置于26℃培养2h～4h，然后将阳性者接种两管半固体，分别放置26℃和37℃恒温培养箱中，培养24h检查，如在26℃有动力者可进行镜检和进一步的生化试验。6.7染色镜检：将上述可疑菌落做涂片染色，进行显微镜观察，呈革兰氏阴性球杆菌，有时呈圆或杆状，大小为(0.8μm~3.0μm)×0.8μm者做以下生化试验。6.8生化特性：将上述可疑的菌落做进一步的生化试验。所有的生化反应皆在26℃培养。本菌主要生化特性以及与其他菌种的区别见表1。表1小肠结肠炎耶尔森氏菌与其他相似菌的生化性状鉴别表项
动力（26℃）
尿素酶
V-P试验（26℃）
鸟氨酸脱羧酶
棉子糖
山梨醇
甘露醇
鼠李糖
小肠结肠炎
耶尔森氏菌
中间型耶
尔森氏菌
注：十阳性，一阴性,d有不同生化型。弗氏耶
尔森氏菌
克氏耶
尔森氏菌
假结核耶
尔森氏菌
鼠疫耶
尔森氏茵
6.9血清型鉴定：除进行生化鉴定外，亦可做血清型鉴定。目前国内可生产27种O型血清因子，供各地使用。具体操作方法与沙门氏菌O因子血清分型相同。57
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中华人民共和国国家标准
GB/T4789.8--2003
代替GB/T4789.8—1994
食品卫生微生物学检验
小肠结肠炎耶尔森氏菌检验
Microbiological examination of food hygiene-Examination of Yersinia enterocolitica2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
2004-01-01实施
GB/T4789.8—2003
本标准对GB/T4789.81994《食品卫生微生物学检验本标准与GB/T4789.8—1994相比主要修改如下：小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》进行修订。按照GB/T1.1-2000对标准文本格式和文字进行修改。一修改并规范原标准中的“设备和材料”。本标准自实施之日起，GB/T4789.8—1994同时废止。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准主要起草人：王淑颖、周桂莲、付荐、杨宝兰。本标准于1984年首次发布，1994年第一次修订，本次为第二次修订。54
1范围
食品卫生微生物学检验
小肠结肠炎耶尔森氏菌检验Www.vV99.net
本标准规定了小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验方法。本标准适用于各类食品及食物中毒样品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验。2规范性引用文件
GB/T4789.8--2003
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T4789.1食品卫生微生物学检验总则GB/T4789.28—2003食品卫生微生物学检验染色法，培养基和试剂3设备和材料
3.1冰箱：0℃~4℃。
3.2恒温培养箱：36℃±1℃、4℃±1℃.26℃±1℃。3.3显微镜：10×~100×。
3.4均质器或灭菌乳钵。
3.5架盘药物天平：0g~500g，精确至0.5g。3.6灭菌试管：16mmX160mm、15mm×100mm。3.7灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5mL、10mL（具0.1mL刻度）。3.8灭菌锥形瓶：500mL、200mL。3.9灭菌培养血：直径90mm。
00.5mL注射器。
灭菌刀、剪子、镊子等。
3.12 小白鼠：12g~15g。
4培养基和试剂
4.1改良磷酸盐缓冲液PSB：按GB/T4789.28—2003中4.46规定。4.2CIN-I培养基：按GB/T4789.28--2003中4.47规定。4.3改良Y培养基：按GB/T4789.28—2003中4.48规定。4.4改良克氏双糖：按GB/T478928—2003中4.49规定。4.5山梨醇、鼠李糖、蔗糖、甘露醇等发酵管：按GB/T4789.28-2003中3.2规定。4.6鸟氨酸脱羧酶肉汤：按GB/T4789.28-2003中3.12规定。4.7半固体琼脂：按GB/T4789.28—2003中4.30规定。4.8V-P试剂：按GB/T4789.28—2003中3.4规定。4.9无菌矿物油。
4.10碱处理液：0.5%氯化物-0.5%氢氧化钾混合液。55
GB/T4789.8--2003
4.11尿素培养基：按GB/T4789.28-2003中4.38规定。5检验程序
小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序见图1。检样25g(mL)+225mL改良磷酸盐缓冲液4℃
肉及其制品，其他食品
碱处理，15s,4.5mL+0.5mL样液
I7d、14d、21d
接种CIN-I.改良Y培养基
26℃，48h
挑取可疑菌落，接种改良克氏双26c
尿素酶试验
半固体
26℃,24h;37℃,24h
生化分型
6操作步骤
6.1样品的采集和处理：见GB/T4789.1，样品采集后应尽快送检。乳及其制品
血清分型
6.2增菌培养：将食物样品与改良的磷酸盐缓冲液增菌液以1：10的比例混合，置4℃冰箱进行冷增菌。
6.3碱处理：将肉及其制品的冷增菌液0.5mL与碱处理液4.5mL混合15s。6.4分离培养：将冷增菌液和碱处理的冷增菌液分别接种CIN-I和改良Y培养基，于26℃48h培养后，在CIN-I上挑取红色牛眼状菌落，在改良Y上挑取无色透明、不粘稠的菌落，进行进一步的鉴定。6.5改良克氏双糖试验：将上述可疑菌落接种改良克氏双糖管，于26℃24h培养，将斜面和底部皆变黄者做进一步的生化鉴定。
GB/T4789.8-2003
6.6尿素酶试验和动力观察将改良克氏双糖上的可疑培养物接种到尿素培养基上，注意接种量要大，挑取接种环，振摇几秒钟，放置于26℃培养2h～4h，然后将阳性者接种两管半固体，分别放置26℃和37℃恒温培养箱中，培养24h检查，如在26℃有动力者可进行镜检和进一步的生化试验。6.7染色镜检：将上述可疑菌落做涂片染色，进行显微镜观察，呈革兰氏阴性球杆菌，有时呈圆或杆状，大小为(0.8μm~3.0μm)×0.8μm者做以下生化试验。6.8生化特性：将上述可疑的菌落做进一步的生化试验。所有的生化反应皆在26℃培养。本菌主要生化特性以及与其他菌种的区别见表1。表1小肠结肠炎耶尔森氏菌与其他相似菌的生化性状鉴别表项
动力（26℃）
尿素酶
V-P试验（26℃）
鸟氨酸脱羧酶
棉子糖
山梨醇
甘露醇
鼠李糖
小肠结肠炎
耶尔森氏菌
中间型耶
尔森氏菌
注：十阳性，一阴性,d有不同生化型。弗氏耶
尔森氏菌
克氏耶
尔森氏菌
假结核耶
尔森氏菌
鼠疫耶
尔森氏茵
6.9血清型鉴定：除进行生化鉴定外，亦可做血清型鉴定。目前国内可生产27种O型血清因子，供各地使用。具体操作方法与沙门氏菌O因子血清分型相同。57
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