本标准规定了食品中维生素A和维生素E的测定方法。本标准适用于食品中维生素A和维生素E的测定。

1Ls67.040
中华人民共和国国家标雅
GB/T5009.82—2003
B/1258—
食品中维生素A和维生素E的测定Delerminaliun of relirtol ard Locophcrol in foods2003-08-11发布
中华入民共和国卫部
中国国家标准化管理委员会
2004-01-01实施
GR/T 5009.82—2003
本准第·-法对流1A.2.我婴然儿配方良品中维兰衰A的阅定—一高款液芭带法CA可用1994年版。
中标第一法对座AC.71.2特就食维生A的测定比色AH1994年版>。
本标与AOAC,S2.C6和AOAC.574.2IV的一致生程度为非等效本标准代替1/13F8-10食物中理生至A和维生案的测定方法3。本标准与GB/12388—990相比主要整血下：候收广标推的中文名称.标准中文名释改必食品中维牛素A和继牛案E的测定；安GB/T20001.4—3001标准编亏规则第4部分：化学分析方法》对原标准的销构进行了悔收，
平标准由中华人民共和国卫生部提并归三。术标起单：中国防次学科学院营养与度品H安研索质.本标确主要起人，上比业、李品、土国栋。标准于！别年益次发布，本次为单一次修订。S
1范田
食品中维生A和维生素E的测定
本标准舰定广食品中维生素A利组生素F的测定小法。本标准适用丁食品中继生系A利维生尽上的刻定。标准出限分：V：08g-E！;-E35.&206。第一法高效液相色语法
2原理
GR/T 5009.82—2003
试样口的维生旁A及生素终电化提取处理后将其认不可皂化分流收至有机剂中：高效滋相色谱反列性将格维生素A和绘生豪E升离，整紫外检划暴格知.关用内标法定量副定，3剂
3.1尤水乙醚：不含有过氧化物，3.1.1过氧化物检查方达：用5mL之如1ml.10%棋化落泄，振握1min，如有过氧化物则效出游离映，水层呈色或加+滴心，治淀粉落液，水层量盐色。该乙醛需处理后传用。3.1.2去除过氧化物的方法：重蒸乙醛时，瓶中放人纯线丝或末少也，弃共10%初询液部13%线馅骏：
3.2无水乙；不得含有醒类物质。3.2.1查方法，取3mL限氧溶于试管守，人少或乙，匀享人氧单化销落绒，加热或盘冷划后若有银说反度测表示乙谢中有醛，3.2.2脱解为法，取2硝配银浮于少灶水中。长4氢氧化钠落温乙醇中。将两老候人-乙醇中，派换后，成置暗处为大本时招动，促进反意）经过滤，置热储瓶中蒸留，奔去切蒸出的5m当的中含卧获多对，碘酸银卫景适当塔加，3.3无水硫酸钠：
3.4牛醇，重热后使用。
3.5重落水：水中加少血高冠腰钾，范用前丧瘤3.6抗坏血酸落液（100g/L》，临用前配制：3.7氢氧化钾液:1+T)，
3.8玺化销群液（100g/）。
3.9硝液(50A/1)
3.10银氨落波：氢水至硝酸很溶液（3.S中，直至生成的沉淀再新萨解为止，再加氢要化液1.数满，对发生注淀，丽期点水百至游。3.11继生素A标痛液：锐黄等（6%)或视资密乙距酷（纯载0%>经化处理后使用：用脱醛乙醇落能维生载A标准品，伙其依度大约1L相当于1视芯醇：临用前用案外分光北度法标定其准遍装度
3.12禁生载标准微：G-生育纯度S5%）-生育（95%）.牛育酸（座95%）.脱醛乙降分别率解以二，种维兰东七怀漏品，佳其依人购1当于1：栋用的用紫外分光光度分别标定此三冲维牛素五熔载的准确浓。593
CH/T 5009.82—2003
3.13内标穿袋：称垃苹产范纯度用脱醛乙睡配制成带当年并！比的内标猝渣。
3. 14 εH_~14试纸:
4发器与设备
4.「实验室营用仅幕。
4.2高效落相也请仪带紫外办无检测器。4.3施特热发器：
4.4高运离心机
4.4. 1小离心管;其塑*益1. 5mL--3. 0 mL整格离心驾（与高速高心机配套)4.5高纯河气，
4.6市福水浴记
4.7崇外分光光Ⅱ。
5分析步骤
5.1试样处理
5.1.1化：称1~10)试样（含维牛案A生素F异构体的为4）化，ml，无水乙醇，讲行摄拌，到颗粒物分做均为止：了m，10抗坏血酸，苯旬范标准浓2.，混。11氢氯化拼（11），混。第水可流30m低皂化完全。化后即剂人水中冷司
5.1.2提收，将皂化后的试样移人分液满斗中，州C术分2次3达错号化微洗救并人分液斗宁：用约100批（酷分两次伪它化款及式共残清，乙醛谦并人分减需斗，如有残造.将，滋通运有少计购脂棉的函斗然人分滤海斗。轻轻振届分波满斗2iT，挣置分层·产去本层5.1.3洗：用约5:1mL水洗分逆漏斗中范乙醛尽,压pF试纸冷验直至水层不显减（故切水洗轻抵，谨次强度可增）
5.1.4浓统等乙醛供求液经过光水硫牌钠（约5g）能入与转热发器配的25um二s0mmL球形蒸发柜内书约10酵冲选分来洞斗及无水情醛动3次，片人发配内牛将其秘至改转蒸发器上，，水浴中戏压然升回收书瓶中利下的2乙赋时.取下薰发瓶.文限用点气收掉z碰。立中加人2,心m.乙醇，充分泥合，辨提取稳51.5将乙醇液移人小塑称离心管<4.4.1心≤min50001/mim）。1清随供色谱分析，如果诚件中罪生素含过少，可用复寄两袭吹十后.再用咬重新定案，！下体积比.5.2标准曲线的制备
5.2、1维生本A和维生表E标准浓度的标定取生京A式各维生素下标唯液荞T微升，分烯环至.，遵中，分则推给定波长定齐组生示的吸为，乐比吸光系数计算该生素的法质，测定条牛如表1所示。表1
祝战障
“乐购
依度第安式（1）
却人拓准紊的昼
比嚼光希较
式中：
系单位为
维生芯药平均紫外吸光伯；
一加人称业报的单，单位为微；E
别利理土索1%[吸光系热：
款追被稀释倍效，
5.2.2标准曲线的制备
GB/T 5009.82—2003
本标准采用内标法量，把一定其的维气素A、生育龄、生育酚，生育的及内标寒并门萨液混合均约，选择否道实整受，使小注物质的各峰高然为满量强70%，为高浓整点，高效准第1/2为低陵度点其内标苯并二二来的浓离值不化），月北种浓度的消合标准运行色治分，钻果见色浩图（照1）继牛案标准山线绘制走以准生素峰面积与内标物峰面积之比为效标，维生案浓度为做尘标会制，或莫式线川方我，划有微处理机装置，则按仪器说明用一点判标法过行定丘，4. 14
5.2元-D内标
S.AF牛育
12.11α生
图·维生表A和生素F色谐图
际堆不能将H-E印Y-F分开改Y-K棘中他含有3F样.5.3高效液相色谱分析
5. 3. 1色谱条件(著考条件)
5. 3. 1.1样:ulrshere 10 m.4mm4, cm.5.3.1.2办新,ultrzsphere(>Ds4.6ux5。5.3.1.3流动和：甲吨1水98-2，混匀：临用前脱气，5. 3. 1.4紫外性测举波K,30am：或程0.025.3. 1. 5过样:2 1..
5.3..6t.tl. ml./mi..
5.4过样分析
取改件维缩液20心.球绘划出色语图改色谐意数后，美进行定性机余展5.4.！空件：用杯准物色详择芯保出时间定性5.4.2宗根长么图求出其和滚生幸评百测与内标物样职的比位，以此值色标准出线上查到其合至。战月叫归我求出其含
CE/T 5009.82—2003
5结果计冀
式中，
维生称的含或，单位为些史年百克nRo心由标准曲载上别桌和维生素告单位为求克每率（）：试样浓定述积，单位为升)，
试样压盘，单位为克（g）。
让算结果志示到三空有效数字
7精密度
重复性条归下状得的两次效立测定结来的绝对差值不得超过算术平均值的1，第二法比色法
8原理
维生素A在三氯甲烧中与三能化筛码互作月，产生蓝色物质·其与解波中质告维生素A的舍至成T比，该蓝色物质而.不稳是，但作一定时闻内可用分产光兜方于62）nm被长处测三其吸光度。9试剂
除非另有说明，在分研中仅使月确定为分析纯药试剂和获增水或柜当纯的求，9.1无水硫酸钠
9.2 乙酸酐:
9.3 2碰.
9.4无水乙醇，
3.5三氯中烷应不含分解药：不测会破坏增生离A。日.5.1险变为运：三氯甲婉不稳实，放置后易受空气中求的作用生或款化氢和光气：检实时可取少鼠一氯印烷试管中汀水少许报播，决化氢溶到水层。加人几待码酸银液，划有白色沉淀即说明一氧甲统中有分解产物。
9.5.2处理方密，减剂应无剂烯是告雪有分解产，如有，则虚于分要漏牛中加水洗数次，无水继酸销吸氯化钙使之脱水、然后蒸瘤。9.6二氯化第-三氯烷游液（52R/1.>，用三氯甲烷的制三氯化销蒂液，储于棕色瓶中（证负勿使吸收术分》
9.7氧化神落液(1-1)
98维生素A或视贵醇乙酸酶标准谦，向3.11.共挑法间5.2.1.9.9耐耐指示剂（10R/T.).用955%Z配制。10惊器
10.实验实常工仪器.
10.2分光光度：
10.3回统冷凝装骨，
11：分析步卿
维索A极易放光破坏，实股操作监弃微辑光线下进行，或用综色鼓璃收器。11.试样处理
权据试性函,可采历底法或磨法。11.1.1嘉化法
GD/T 5009.82—2003
适同上维牛索A含量不户的试样，减少商资性物届的十杭，件全部试验让程费时，上易致维注素A损失，
11.1.1.1宅化：版试扫十维牛索人含量的不同.准确称取0.×5长或样于三角瓶币，后人1㎡料化钾（111)及20m--40m7呼，于以热板上回30min五皂化芳全为：11.1.1.2无敢：将笔化就内握合物移率分液漏牛中，以50m.水洗息化瓶·沈液并人分商递：血车泄于，可用脱脂构平滤人分被诵斗内。升5乙醛分二次洗单放，洗油人分装滑斗甲握据并正意改气，醇置分层异，水层放人第“个分液需斗内，总化瓶再月约303，乙醚分二次冲洗，洗顿人第二个分液新斗它批端后，静笠分层、水总或人一角新中，醚层与第个分漏斗合井，重复至水梁中五差牛嘉人为山
11.1.1.3流涤：用的8r.水加入第-个分漏4中，轻轻振摇，净胃片划，放去水层，加15L-2℃.51el/氢氧化祥缩被丁分液污斗中，轻整抵护后，齐去下层碱液，除去酸溶性联皂。维续用水济漆次用水药30mL.主会选液与断以指示剂号无色为止（天款次）避层液挣置1:mir-20 m,小心效出拆的水，
11.1.1.4箱：将醛层被经过无水碗酸钠选入三角瓶巾，再用约25勿乙醛洗分料诺-和价即纳两次，就滋并人一有瓶内。胃水答上溜，收乙醛。待瓶户剩药5.乙晓时取下，用抽气偿至，即人一庭量的一家甲使帝夜中维生素A舍地在适宜达度范至内，11.1.2研磨法
适用于年克试样细生素A含量大于5～试样的测定，如开的分析。步骤尚单，省脏，结果谁鸡，
11.1.2.1码要：病确称2R~55试样，放人有5借--5倍试样质减的无水酸的码铣中，码展至试样中水分完全被吸收，并均质化。11.1.2.2提取：小心地特全部均压化试样移人带的一鱼瓶内，准确加人50m二~.109m！.乙醛，案玉荒子-币小带拢2min，使试样确生A将二乙醒十。使其口行说清（大的需11～2i，或离心登清（因乙醒易挥发，气温高时应在冷水浴中操作，装乙醛的试别瓶也应事先激人冷水落中）11.1.2.3浓缩，取微的乙胜带减2mL~-5mL，放入比色些7.在70℃:--80心水路上拥气菜十，立即归人1m一氯甲烷熔解残落，12副是
12.标准两线的制备
准确取一定年的维生案A标注波于45个穿量瓶中.以一急甲就配制标准系列，再取相同量比年顺达【m.三新中和标痛承列使向能「m各管划人乙载所1滴，制成标痛比色列：元n波长处，以一月调节吸光度举平点，将共标准比色列按标序移人光路前，速川人I三氧化销-三点平烷溶滋，于5内损定吸光度，总吸光度为纵坐标，维牛人含量为横小标续制标准曲图，
12.2试样测定
于一比户人10m二瓶加人1滴之龄件空自腋，另一比色出加人1m三额中烧.其余比色者牛分别标人1m！.试样落液及1满乙酸酐其余步糜同标准帕线的带备-597
GB/T5009.82—2D33
13结果计算
X=VTGC
试十综牛亲的合（如安国际单位，帮1国际单位一1统素！单位为套克每百(mg/1oo)
由标准曲线土查游试样中维家A的含量，单位为微克得实工：一试详质量，前位为克（g)：Www.vV99.net
一我收后加氯平筛是量之体瓶，单歪为笔几（m二1n—改每互克设样计。
算结果保单一位有效效字。
14精密度
车蛋要性条件下获得范调次独立测定结果的等双差值不得超过算术半沟值的%。asa
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。