埃博拉病毒（EBOV）是一种能引起人类和灵长类动物发生埃博拉出血热（EBHF）的烈性病毒，利用相应的生物学技术制备出抗EBOV的单克隆抗体，可快速检测EBOV．请回答下列问题：（1）方法一：给小鼠注射纯化的EBOV蛋白，一段时间后，从小鼠的中获取浆细胞，将获得的浆细胞与小鼠的细胞融合，再经过至少两次、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞．（2）方法二：科学家从细胞中分离出无限增殖基因（prG），可将prG基因导入能产生抗EBOV抗体的小鼠浆细胞中，导入prG基因的浆细胞具有的特点．（3）以上两种方法获得的杂交
2019-04-28
埃博拉病毒（EBOV）是一种能引起人类和灵长类动物发生埃博拉出血热（EBHF）的烈性病毒，利用相应的生物学技术制备出抗EBOV的单克隆抗体，可快速检测EBOV．请回答下列问题：
（1）方法一：给小鼠注射纯化的EBOV蛋白，一段时间后，从小鼠的___中获取浆细胞，将获得的浆细胞与小鼠的___细胞融合，再经过至少两次___、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞．
（2）方法二：科学家从细胞中分离出无限增殖基因（prG），可将prG基因导入能产生抗EBOV抗体的小鼠浆细胞中，导入prG基因的浆细胞具有___的特点．
（3）以上两种方法获得的杂交瘤细胞或带有prG基因的浆细胞，可在___的环境、营养、适宜的___和一定的气体环境等条件下进行体外培养，以便源源不断的产生抗EBOV的单克隆抗体．
（4）方法二中，若用PCR扩增方法获取目的基因，则需要用到___酶，该方法能够成功获取目的基因的前提是要有___，以便合成___．
优质解答
（1）制备单克隆抗体时，首先给小鼠注射抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已经免疫的B细胞，然后与小鼠的骨髓瘤细胞融合，再经过至少两次筛选（第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选是用抗体阳性检测法筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞）、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞．
（2）浆细胞能产生抗体，但不能无限增殖，prG基因使细胞无限增殖，因此导入prG基因的浆细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生抗EBOV的（特异性或专一性或所需的）抗体．
（3）动物细胞培养需要的条件为：无菌、无毒的环境、营养、适宜的温度和pH和一定的气体环境等．
（4）PCR技术是在较高温度条件下进行的，因此该过程需要用到耐高温的DNA聚合（或“Taq”）酶；该方法能够成功获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因核苷酸序列，以便合成引物．
故答案为：
（1）脾脏 骨髓瘤 筛选
（2）既能无限增殖，又能产生抗EBOV的（特异性或专一性或所需的）抗体
（3）无菌、无毒 温度和pH
（4）耐高温的DNA聚合（或“Taq”） 一段已知的目的基因核苷酸序列 引物
（1）制备单克隆抗体时，首先给小鼠注射抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已经免疫的B细胞，然后与小鼠的骨髓瘤细胞融合，再经过至少两次筛选（第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选是用抗体阳性检测法筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞）、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞．
（2）浆细胞能产生抗体，但不能无限增殖，prG基因使细胞无限增殖，因此导入prG基因的浆细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生抗EBOV的（特异性或专一性或所需的）抗体．
（3）动物细胞培养需要的条件为：无菌、无毒的环境、营养、适宜的温度和pH和一定的气体环境等．
（4）PCR技术是在较高温度条件下进行的，因此该过程需要用到耐高温的DNA聚合（或“Taq”）酶；该方法能够成功获取目的基因的前提是要有一段已知的目的基因核苷酸序列，以便合成引物．
故答案为：
（1）脾脏 骨髓瘤 筛选
（2）既能无限增殖，又能产生抗EBOV的（特异性或专一性或所需的）抗体
（3）无菌、无毒 温度和pH
（4）耐高温的DNA聚合（或“Taq”） 一段已知的目的基因核苷酸序列 引物