A、脊椎动物比无脊椎动物高等，但无脊椎动物中的节肢动物是世界上最大的类群．A错误；
B、脊椎动物和无脊椎动物的不同在于有无脊柱．B正确；
C、哺乳动物最高等，但种类不是最多的，分布也不是最广的．数量最多、分布最广的是节肢动物．C错误；
D、无脊椎动物虽然低等，但对人类的作用很大，如软体动物中的乌贼等可以食用，节肢动物中的蜜蜂可以传粉．D错误．
故选：B A、脊椎动物比无脊椎动物高等，但无脊椎动物中的节肢动物是世界上最大的类群．A错误；
B、脊椎动物和无脊椎动物的不同在于有无脊柱．B正确；
C、哺乳动物最高等，但种类不是最多的，分布也不是最广的．数量最多、分布最广的是节肢动物．C错误；
D、无脊椎动物虽然低等，但对人类的作用很大，如软体动物中的乌贼等可以食用，节肢动物中的蜜蜂可以传粉．D错误．
故选：B