【生物--现代生物科技专题】某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam HI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉索基因．利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题．（l）在构建重组质粒时，应选用两种限制酶对进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性．（2）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加，理由是．（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用技术，即通过和两个主要过程最终形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加．

2019-04-29

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【生物--现代生物科技专题】
某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam HI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉索基因．利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题．

（l）在构建重组质粒时，应选用______两种限制酶对______进行切割，然后进行连接，以保证重组DNA序列的唯一性．
（2）为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，应在培养基中加______，理由是______．
（3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用______技术，即通过______和______两个主要过程最终形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加______．

优质解答

（1）BamHI的酶切位点在目的基因（抗盐基因）中，若用此限制酶，会破坏目的基因的结构，最终得不到转基因抗盐烟草，所以选用SalⅠ和HindⅢ对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割．
（2）由于SalⅠ和HindⅢ的酶切位点在抗四环素基因中．在构建重组质粒时，抗四环素基因结构遭到破坏，故只能在培养基中加入氨苄青霉素来筛选导入重组质粒的农杆菌．
（3）采用植物组织培养技术可将植物细胞培育成完整的植株．植物组织培养过程中，主要经过脱分化和再分化形成完整植株，此过程须向培养基中加入植物激素（如生长素和细胞分裂素）．
故答案为：
（l）SalⅠ和HindⅢ质粒和抗盐基因的DNA
（2）氨苄青霉素  重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏
（3）植物组织培养  脱分化  再分化  植物激素（植物生长调节剂或生长素和细胞分裂素）（1）BamHI的酶切位点在目的基因（抗盐基因）中，若用此限制酶，会破坏目的基因的结构，最终得不到转基因抗盐烟草，所以选用SalⅠ和HindⅢ对质粒和含抗盐基因的DNA进行切割．
（2）由于SalⅠ和HindⅢ的酶切位点在抗四环素基因中．在构建重组质粒时，抗四环素基因结构遭到破坏，故只能在培养基中加入氨苄青霉素来筛选导入重组质粒的农杆菌．
（3）采用植物组织培养技术可将植物细胞培育成完整的植株．植物组织培养过程中，主要经过脱分化和再分化形成完整植株，此过程须向培养基中加入植物激素（如生长素和细胞分裂素）．
故答案为：
（l）SalⅠ和HindⅢ质粒和抗盐基因的DNA
（2）氨苄青霉素  重组质粒中含抗氨苄青霉素基因而抗四环素基因被破坏
（3）植物组织培养  脱分化  再分化  植物激素（植物生长调节剂或生长素和细胞分裂素）