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回答下列有关基因表达和生物工程问题.(1)基因工程是生物工程核心技术.下列是分子实验室中构建产生胰岛素基因工程菌的部分操作,正确流程是.(用题中编号排序)①筛选含有胰岛素基因的受体细胞   ②胰岛素基因与运载体重组③重组DNA导入受体细胞           ④获取胰岛素基因如图所示为用PvuⅠ限制酶切下的某目的基因(4kb,lkb=1000个碱基对长度)及其上DNA

2019-05-22

回答下列有关基因表达和生物工程问题.
(1)基因工程是生物工程核心技术.下列是分子实验室中构建产生胰岛素基因工程菌的部分操作,正确流程是___.(用题中编号排序)
①筛选含有胰岛素基因的受体细胞   ②胰岛素基因与运载体重组
③重组DNA导入受体细胞           ④获取胰岛素基因
如图所示为用PvuⅠ限制酶切下的某目的基因(4kb,lkb=1000个碱基对长度)及其上DNA片段不意图.
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(2)片段D为目的基因中的某一片段,有关叙述正确的是___(多选).
A.若图中的ACT能决定一个氨基酸,则ACT可称为一个密码子
B.DNA连接酶作用于②处,DNA解旋酶作用于①处
C.若只用片段D中的3个碱基对,则可以排列出43种片段
D.同一脱氧氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间依次经过“一脱氧核糖-磷酸基-脱氧核糖-”连接
如图2所示为三种质粒示意图.图中AP为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因.EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离.复制原点是在基因组上复制起始的一段序列,是指质粒在受体细胞中复制时的起点.
(3)图中质粒A、质粒C能否作为目的基因运载体最理想的质粒?___(能/否).为什么,
请说明理由___.
(4)用EcoRⅠ完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒(EcoRⅠ在目的基因和质粒上的酶切位点如上两图所示),则进行电泳后观察可出现长度为1.1kb和___kb,或者分别是___kb和___kb两个片段.(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计).
优质解答
(1)基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达.因此,正确流程是④获取胰岛素基因(获取目的基因)、②胰岛素基因与运载体重组(构建基因表达载体)、③重组DNA导入受体细胞(将目的基因导入受体细胞)、①筛选含有胰岛素基因的受体细胞(目的基因的检测与表达).
(2)A、密码子位于mRNA上,因此DNA上的ACT不能成为密码子,A错误;
B、DNA连接酶作用于②磷酸二酯键处,DNA解旋酶作用于①氢键处,B正确;
C、若只用片段D中的3个碱基对,则可以排列出3×2×1=6种片段,C错误;
D、同一脱氧氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间依次经过“一脱氧核糖-磷酸基-脱氧核糖-”连接,D正确.
故选:BD.
(3)质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制.因此,图中质粒A、质粒C不能作为目的基因运载体最理想的质粒.
(4)由于目的基因与质粒B可能发生正向连接,也可能发生反向连接,因此用EcoRⅠ完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒,进行电泳后观察可出现长度为0.8-0.7+1=1.1kb和5.6kb,或者分别是0.8-0.7+3=3.1kb和(1.1+5.6)-3.1=3.6kb两个片段.
故答案为:
(1)④②③①
(2)BD
(3)否        质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制
(4)5.6           3.1      3.6(3.1和3.6可以更换位置)
(1)基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达.因此,正确流程是④获取胰岛素基因(获取目的基因)、②胰岛素基因与运载体重组(构建基因表达载体)、③重组DNA导入受体细胞(将目的基因导入受体细胞)、①筛选含有胰岛素基因的受体细胞(目的基因的检测与表达).
(2)A、密码子位于mRNA上,因此DNA上的ACT不能成为密码子,A错误;
B、DNA连接酶作用于②磷酸二酯键处,DNA解旋酶作用于①氢键处,B正确;
C、若只用片段D中的3个碱基对,则可以排列出3×2×1=6种片段,C错误;
D、同一脱氧氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间依次经过“一脱氧核糖-磷酸基-脱氧核糖-”连接,D正确.
故选:BD.
(3)质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制.因此,图中质粒A、质粒C不能作为目的基因运载体最理想的质粒.
(4)由于目的基因与质粒B可能发生正向连接,也可能发生反向连接,因此用EcoRⅠ完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒,进行电泳后观察可出现长度为0.8-0.7+1=1.1kb和5.6kb,或者分别是0.8-0.7+3=3.1kb和(1.1+5.6)-3.1=3.6kb两个片段.
故答案为:
(1)④②③①
(2)BD
(3)否        质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制
(4)5.6           3.1      3.6(3.1和3.6可以更换位置)
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