（1）基因工程中构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，DNA连接酶中，T₄DNA连接酶可连接DNA的两个末端．
（2） A、筛选与分离工程菌需要用涂布法将受体菌群接种在培养基表面，A正确；
B、根据题干可知，目的菌能够在含有氨苄青霉素和X-gal的培养基上生存，所以筛选与分离时的培养基应含有氨苄青霉素和X-gal，B正确；
C、接种时接种环应该使用灼烧灭菌，C正确；
D、根据题干可知，受体菌不含LacZ基因和氨苄青霉素抗性基因，不能使大肠杆菌菌落呈蓝色，D错误．
故选：D．
（3）植物转基因技术中，最常用的导入目的基因的方法是农杆菌转化法，其中需要的运载体是Ti质粒，目的基因插入到该运载体的T-DNA 中，以便使植物细胞得以转化．这是双子叶植物和裸子植物常用的一种基因转化方法．
（4）动物基因工程中，一般把目的基因导入动物的受精卵细胞中，原因是全能性高，容易表达．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶 （限制酶） T₄DNA连接酶
（2）D
（3）农杆菌转化法  Ti质粒   T-DNA   双子叶
（4）受精卵 （1）基因工程中构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，DNA连接酶中，T₄DNA连接酶可连接DNA的两个末端．
（2） A、筛选与分离工程菌需要用涂布法将受体菌群接种在培养基表面，A正确；
B、根据题干可知，目的菌能够在含有氨苄青霉素和X-gal的培养基上生存，所以筛选与分离时的培养基应含有氨苄青霉素和X-gal，B正确；
C、接种时接种环应该使用灼烧灭菌，C正确；
D、根据题干可知，受体菌不含LacZ基因和氨苄青霉素抗性基因，不能使大肠杆菌菌落呈蓝色，D错误．
故选：D．
（3）植物转基因技术中，最常用的导入目的基因的方法是农杆菌转化法，其中需要的运载体是Ti质粒，目的基因插入到该运载体的T-DNA 中，以便使植物细胞得以转化．这是双子叶植物和裸子植物常用的一种基因转化方法．
（4）动物基因工程中，一般把目的基因导入动物的受精卵细胞中，原因是全能性高，容易表达．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶 （限制酶） T₄DNA连接酶
（2）D
（3）农杆菌转化法  Ti质粒   T-DNA   双子叶
（4）受精卵