为了得到普洱茶中产蛋白酶的微生物，研究人员进行了一系列筛选、检测．（1）研究人员称取普洱茶1g，加入，制备稀释102倍的茶叶水．再将茶叶水进行梯度稀释，获得A103、104、105倍的稀释茶叶水．取100μL稀释茶叶水，用法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4-5天，在培养基中选择菌落周围的较大的菌株作为目的菌株．（2）将获得的多个目的菌株接种于液体茶汤培养基中培养．已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量．先用绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶
2019-05-22
为了得到普洱茶中产蛋白酶的微生物，研究人员进行了一系列筛选、检测．
（1）研究人员称取普洱茶1g，加入___，制备稀释102倍的茶叶水．再将茶叶水进行梯度稀释，获得A103、104、105倍的稀释茶叶水．取100μL稀释茶叶水，用___法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4-5天，在培养基中选择菌落周围的___较大的菌株作为目的菌株．
（2）将获得的多个目的菌株接种于液体茶汤培养基中培养．已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量．先用___绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值，与标准曲线比较，计算出该茶汤中游离氨基酸的量，氨基酸含量高的，即为___的菌株．该实验中应测定___的液体茶汤培养基的游离氨基酸含量，作为对照组的数据．
优质解答
（1）在稀释涂布平板法中，首先对溶液进行梯度稀释，即称取普洱茶1g，加入99mL无菌水，可制备稀释102倍的茶叶水．再将茶叶水进行梯度稀释，获得A103、104、105倍的稀释茶叶水．取100μL稀释茶叶水，用（稀释）涂布法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4-5天，由于该茶叶中含有能够产生蛋白酶的微生物，因此在培养基中选择菌落周围的透明圈（或“水解圈”）较大的菌株作为目的菌株．
（2）已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量．先用已知浓度的氨基酸溶液测定结果绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值，与标准曲线比较，计算出该茶汤中游离氨基酸的量，氨基酸含量高的，即为蛋白酶产生量高的菌株．该实验中应测定不接种（或“接种灭活菌株”）的液体茶汤培养基的游离氨基酸含量，作为对照组的数据．
故答案为：
（1）99mL无菌水（稀释）涂布透明圈（或“水解圈”）
（2）已知浓度的氨基酸溶液测定结果蛋白酶产生量高不接种（或“接种灭活菌株”）
（1）在稀释涂布平板法中，首先对溶液进行梯度稀释，即称取普洱茶1g，加入99mL无菌水，可制备稀释102倍的茶叶水．再将茶叶水进行梯度稀释，获得A103、104、105倍的稀释茶叶水．取100μL稀释茶叶水，用（稀释）涂布法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4-5天，由于该茶叶中含有能够产生蛋白酶的微生物，因此在培养基中选择菌落周围的透明圈（或“水解圈”）较大的菌株作为目的菌株．
（2）已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量．先用已知浓度的氨基酸溶液测定结果绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值，与标准曲线比较，计算出该茶汤中游离氨基酸的量，氨基酸含量高的，即为蛋白酶产生量高的菌株．该实验中应测定不接种（或“接种灭活菌株”）的液体茶汤培养基的游离氨基酸含量，作为对照组的数据．
故答案为：
（1）99mL无菌水（稀释）涂布透明圈（或“水解圈”）
（2）已知浓度的氨基酸溶液测定结果蛋白酶产生量高不接种（或“接种灭活菌株”）