（1）农杆菌的Ti质粒是拟核外环状DNA分子，分布在细菌细胞的细胞质，图中A表示Ti质粒的T-DNA；切割A需要使用限制性内切酶．
（2）将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即常用Ca²⁺处理微生物细胞，使其成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞．
（3）培养E需要添加营养物质和植物激素，其目的是诱导细胞通过脱分化和再分化过程发育为完整植株；培养要求无菌操作的原因是杂菌的生长一方面会与目标培养物竞争营养，从而使其失去营养；另一方面会产生大量对目标培养物有害的物质，导致其不能正常生长甚至死亡．
（4）判断愈伤组织是否产生，依据是：看是否产生了排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的细胞．由愈伤组织再分化过程中需要光照，原因是叶肉细胞中的叶绿素的合成需要光照．
故答案为：
（1）T-DNA   限制酶
（2）Ca²⁺   能吸收周围环境中DNA分子的
（3）脱分化和再分化   杂菌的生长一方面会与目标培养物竞争营养，从而使其失去营养；另一方面会产生大量对目标培养物有害的物质，导致其不能正常生长甚至死亡
（4）排列疏松，呈不定形状态、高度液泡化的薄壁    叶肉细胞中的叶绿素的合成需要光照 （1）农杆菌的Ti质粒是拟核外环状DNA分子，分布在细菌细胞的细胞质，图中A表示Ti质粒的T-DNA；切割A需要使用限制性内切酶．
（2）将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即常用Ca²⁺处理微生物细胞，使其成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞．
（3）培养E需要添加营养物质和植物激素，其目的是诱导细胞通过脱分化和再分化过程发育为完整植株；培养要求无菌操作的原因是杂菌的生长一方面会与目标培养物竞争营养，从而使其失去营养；另一方面会产生大量对目标培养物有害的物质，导致其不能正常生长甚至死亡．
（4）判断愈伤组织是否产生，依据是：看是否产生了排列疏松而无规则、高度液泡化的呈无定形状态的细胞．由愈伤组织再分化过程中需要光照，原因是叶肉细胞中的叶绿素的合成需要光照．
故答案为：
（1）T-DNA   限制酶
（2）Ca²⁺   能吸收周围环境中DNA分子的
（3）脱分化和再分化   杂菌的生长一方面会与目标培养物竞争营养，从而使其失去营养；另一方面会产生大量对目标培养物有害的物质，导致其不能正常生长甚至死亡
（4）排列疏松，呈不定形状态、高度液泡化的薄壁    叶肉细胞中的叶绿素的合成需要光照