A、目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物，如目的基因：动物可提供胰岛素基因，微生物可提供抗虫基因；受体细胞：前者可用大肠杆菌，后者可用棉花，动物可用受精卵作受体细胞，A正确；
B、人胰岛素是由胰岛B细胞分泌的具有生物活性的蛋白质，需要内质网和高尔基体的加工和分泌．而大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体，所以人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，B正确；
C、转基因植物的DNA经过重组后，有可能合成出对人体有直接毒性或潜在毒性的蛋白质；转基因农作物所表达的某些蛋白质，可能会潜移默化地影响人的免疫系统，从而对人体健康造成隐性的伤害，食用者在过了若干年或者一两代之后，问题才显现出来，C正确；
D、载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞，但是与目的基因的表达无关，D错误．
故选：D． A、目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物，如目的基因：动物可提供胰岛素基因，微生物可提供抗虫基因；受体细胞：前者可用大肠杆菌，后者可用棉花，动物可用受精卵作受体细胞，A正确；
B、人胰岛素是由胰岛B细胞分泌的具有生物活性的蛋白质，需要内质网和高尔基体的加工和分泌．而大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体，所以人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，B正确；
C、转基因植物的DNA经过重组后，有可能合成出对人体有直接毒性或潜在毒性的蛋白质；转基因农作物所表达的某些蛋白质，可能会潜移默化地影响人的免疫系统，从而对人体健康造成隐性的伤害，食用者在过了若干年或者一两代之后，问题才显现出来，C正确；
D、载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞，但是与目的基因的表达无关，D错误．
故选：D．