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【生物--选修3现代生物科技专题】为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小．下表是某小组进行的相关实验．已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）第一步水解产物（单位bp）第二步水解产物（单位bp）A酶切割2100将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割1900   2001400 800   &nb

2019-04-29

【生物--选修3现代生物科技专题】
为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小．下表是某小组进行的相关实验．
已知一线性DNA序列共有5000bp（bp为碱基对）第一步水解产物
（单位bp）		第二步水解产物
（单位bp）
A酶切割2100将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割1900   200
1400 800    600
10001000
500500
B酶切割2500将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割1900   600
1300800    500
12001000   200
经A酶和B酶同时切割1900    1000    800    600    500    200
（1）由上表可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和______个．
（2）根据表中数据，请在图1中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小

（3）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示．用这两种限制酶完全切割相应的DNA片段时．产生的末端是______末端．现用这两种酶和DNA连接酶对若干段同种DNA分子（含有BamHI与BglII的识别序列各一个）进行反复的切割（完全切割）、连接操作，若干循环．一段时间后反应液中会出现多种核苷酸片段，其中能够连接且不被BamHI与BglII切割的序列是______、______．
优质解答
（1）A酶切割后形成4段，所以有3个识别位点，B酶切割后形成3段，所以有2个切割位点．
（2）由表中酶切割后片段长度可知，1900+600=2500，800+500=1300，1000+200=1200，所以连接如图所示．

（3）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示．用这两种限制酶完全切割相应的DNA片段时．限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA两条链分别切开，故产生的末端是黏性末端．现用这两种酶和DNA连接酶对若干段同种DNA分子（含有BamHI与BglII的识别序列各一个）进行反复的切割（完全切割）、连接操作，若干循环．一段时间后反应液中会出现多种核苷酸片段，其中能够连接且不被BamHI与BglII切割的序列是、．
故答案为：
（1）3           2     
（2）

（3）黏性          （1）A酶切割后形成4段，所以有3个识别位点，B酶切割后形成3段，所以有2个切割位点．
（2）由表中酶切割后片段长度可知，1900+600=2500，800+500=1300，1000+200=1200，所以连接如图所示．

（3）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示．用这两种限制酶完全切割相应的DNA片段时．限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA两条链分别切开，故产生的末端是黏性末端．现用这两种酶和DNA连接酶对若干段同种DNA分子（含有BamHI与BglII的识别序列各一个）进行反复的切割（完全切割）、连接操作，若干循环．一段时间后反应液中会出现多种核苷酸片段，其中能够连接且不被BamHI与BglII切割的序列是、．
故答案为：
（1）3           2     
（2）

（3）黏性         
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