A、鲁宾和卡门通过同位素示踪法证明光合作用释放的O₂来源水；利用同位素标记的亮氨酸追踪分泌蛋白的合成、加工和运输过程，A正确；
B、观察DNA和RNA在细胞中的分布使用了盐酸使细胞膜丧失选择透过性，绿叶中色素的提取和分离实验中使用了无水乙醇、二氧化硅、碳酸钙、层析液等，但是没有使用盐酸，B错误；
C、活菌计数法对微生物进行计数、花生子叶中脂肪的检测和观察实验都要使用显微镜观察，C正确；
D、观察植物细胞的吸水和失水、观察线粒体和叶绿体的形态和分布的实验都需要实验材料保持生物活性，D正确．
故选：B． A、鲁宾和卡门通过同位素示踪法证明光合作用释放的O₂来源水；利用同位素标记的亮氨酸追踪分泌蛋白的合成、加工和运输过程，A正确；
B、观察DNA和RNA在细胞中的分布使用了盐酸使细胞膜丧失选择透过性，绿叶中色素的提取和分离实验中使用了无水乙醇、二氧化硅、碳酸钙、层析液等，但是没有使用盐酸，B错误；
C、活菌计数法对微生物进行计数、花生子叶中脂肪的检测和观察实验都要使用显微镜观察，C正确；
D、观察植物细胞的吸水和失水、观察线粒体和叶绿体的形态和分布的实验都需要实验材料保持生物活性，D正确．
故选：B．